作者：刘素英 冯素香 黄国稠 李小青

【摘要】 目的 建立高效液相色谱法测定盐酸溴己新片的含量。方法 色谱柱：Alltima C18柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）；流动相: 乙腈0.05 mol·L-1磷酸盐缓冲液（含0.2％三乙胺，pH=3.0）（体积比30∶70），流速1.0 mL·min-1，检测波长为249 nm 。 结果 盐酸溴己新在66.0～96.4 μg·mL-1浓度范围内线性良好（r＝0.999 9，n＝5），平均回收率为98.85％(RSD=0.60％，n＝6）。结论 本法快速、简便、准确，重复性好。
【关键词】 高效液相色谱法；盐酸溴己新；含量测定
　　Abstract: Objective To establish a method for content determination of bromhexine hydrochloride in tablets.Methods Bromhexine hydrochloride in the tablets was analyzed on an Alltima C18（4.6 mm×150 mm，5 μm）column with mobile phase composed of acetonitrile0.05 mol·L-1 phosphate buffer (30∶70， final pH3.0 adjusted with 0.2% triethylamine). The flow rate was 1.0 mL·min-1 with UV detection wavelength at 249 nm.Results Calibration graph was linear (r=0.9999， n=6) in concentration range 66.096.4 μg·mL-1 . The average recovery of bromhexine hydrochloride was 98.85％ and RSD 0.60％ (n＝6）.Conclusions The method is simple， rapid and reproducible.
　　Key words:HPLC；bromhexine hydrochloride
　　盐酸溴己新是一种临床上常用的祛痰药，疗效确切。目前盐酸溴己新的含量测定方法有紫外分光光度法［1］、HPLC法［2］和毛细管电泳法［3］，中华人民共和国药典2005年版收载的盐酸溴己新片的含量测定方法为紫外分光光度法，但该法测含量专属性不够强，易受辅料干扰［4］。为系统评价其药品质量，确保临床疗效，本文建立了高效液相色谱法测定盐酸溴己新含量的条件，并与紫外－可见分光光度法的测定结果做比较，结果表明高效液相色谱法更为简便、准确、专属性强。
　　1仪器与试药
　　1.1仪器　　
　　　　
　　岛津LC10AT型高效液相色谱仪，岛津SPD10A紫外检测器；UV2450型紫外可见分光光度计
　　1.2试药
　　　　
　　盐酸溴己新对照品（100427200402，供含量测定用）购自中国药品生物制品检定所；盐酸溴己新片（广州南沙琪宝制药有限公司，批号20060805，20060807，20060810）；乙腈为色谱纯，其余试剂为分析纯。
　　2方法与结果
　　2.1色谱条件
　　　　
　　色谱柱：Alltima C18柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）；流动相：乙腈0.05 mol·L-1磷酸盐缓冲液（含0.2％三乙胺，pH=3.0）（体积比30∶70）；检测波长249 nm，流速1.0 mL·min-1，进样量20 μL。色谱图见图1。
　　2.2溶液的制备
　　2.2.1对照品溶液的制备
　　　　
　　精密称取10.6 mg盐酸溴己新对照品，置25 mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取2 mL至10 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，用0.45 μm的微孔薄膜滤过，即得质量浓度为84.80 μg/mL的对照品溶液。
　　2.2.2供试品溶液的制备
　　　　
　　精密取样品0.15 g，置于50 mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取2 mL至10 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，0.45 μm的微孔薄膜滤过，即得。
　　2.2.3空白溶液的制备
　　　　
　　将不含被分析成分的盐酸溴己新辅料混合均匀后，精密称取93.9 mg到50 mL容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
　　图1HPLC图谱　略
　　2.3线性关系考察
　　　　
　　分别精密吸取对照品溶液4、8、10、16、20 μL，进样测定峰面积。以色谱峰峰面积（A）为纵坐标，对照品进样量（m）为横坐标，绘制标准曲线并进行线性回归，得回归方程：A＝27 251m-120 995（r＝0.999 9，n＝5），结果表明，盐酸溴己新的进样量在66.0～96.4 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系，线性范围是33.92～169.6 μg·mL-1。

　　2.4精密度试验
　　　　
　　取同一对照品溶液，按上述色谱条件，连续进样6次，每次20 μL，测定峰面积，结果峰面积的RSD为0.59％，表明精密度良好。
　　2.5稳定性试验
　　　　
　　取同一供试品溶液，分别于制备后0、2、4、8、12、16、24 h进样，按上述色谱条件测定，峰面积的RSD为0.71％。说明盐酸溴己新样品溶液在24 h内基本稳定。
　　2.6重复性试验
　　　　
　　分别取同一批供试品，按“2.2.2”项下方法重复制备样品6份，并按以上色谱条件进行测定，计算得盐酸溴己新含量分别为99.92％、100.93％、100.12％、99.58％、99.50％、101.20％，RSD为0.70％，结果表明供试品制备方法重复性良好。
　　2.7回收率试验
　　　　
　　取已知含量的样品约0.05 g，共6份，精密称定，分别精密加入盐酸溴己新对照品18.00、18.40、20.10、20.90、21.90、22.90 mg，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，按上述色谱条件进行测定，计算回收率，结果见表1。
　　表1盐酸溴己新回收率试验结果（略）
　　2.8样品测定
　　
　　分别精密称取3批样品， 按“2.2.2”项下方法制备，按上述色谱条件进行测定，结果见表2。
　　表2盐酸溴己新片的含量测定结果（略）
　　3讨 论
　　3.1本实验通过对盐酸溴己新对照品溶液进行紫外扫描（190～400 nm），得到紫外吸收图，结果发现盐酸溴己新在249 nm处有最大吸收峰，故选择249 nm为检测波长。
　　3.2实验中曾考察过甲醇冰醋酸水溶液、乙腈冰醋酸水溶液、甲醇磷酸盐缓冲液、乙腈磷酸盐缓冲液等不同的流动相系统，结果发现乙腈磷酸盐缓冲液（0.05 mol·L-1磷酸二氢钾溶液加0.2％三乙胺溶液，用磷酸调节pH为3.0）（体积比30∶70）为流动相时，盐酸溴己新的峰形好，赋形剂也不干扰其测定。本法测定盐酸溴己新的含量，回收率高，呈良好线性，重复性良好，符合定量分析要求。
　　3.3同时对相同3批样品按中国药典［1］中的紫外分光光度法进行测定，结果平均标示量分别为101.3%、101.8%、98.6%，RSD分别为1.36%、1.82%、1.90%(n=6)；与HPLC法的测定结果比较，2种方法之间差异没有显著性。
【参考文献】
　　［1］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典：二部［S］.北京:化学工业出版社，2005:585-586.

　　［2］ 殷国真，韩加怡.高效液相色谱法测定定喘止咳胶囊中三组分的含量［J］.现代应用药学，1995，12(2):56-57.

　　［3］ 邹定，吴学军，南国柱.毛细管区带电泳测定复方氯丙那林片中3种药物含量［J］.中国药学杂志，1998，33(6):360-362.

　　［4］ 叶隽，陈斌.HPLC法测定盐酸溴己新片的含量及溶出度［J］.药学服务与研究，2006，6(2)：148-149.

转贴于